荧光定量的目的？

一、荧光定量的目的？

不浪费电，也许是试验要求只规定这个度，还有保护眼睛。

二、荧光定量pcr原理？

荧光定量PCR是一种基于PCR技术的、灵敏、精确、可定量检测DNA的方法。其原理是，在PCR过程中加入荧光染料，当靶基因扩增到一定数量时，荧光信号达到了可检测的阈值，就可以通过荧光信号的强度来定量检测目标基因的存在量。荧光信号的增长可以直接反映PCR产物的数量，可以准确计算出靶基因的起始浓度。此外，该技术还可以通过不同荧光染料的选择，实现多靶点同时检测，从而提高检测效率。总之，荧光定量PCR技术的原理是通过荧光信号来实现基因数量的定量测定，具有高灵敏度、高精度和高通量等优点，是现代生物技术和生物医学研究中重要的实验手段之一。

三、荧光定量PCR技术？

实时检测PCR扩增，在扩增的指数期对起始模板进行定量，在扩增过程中，荧光信号随着PCR产物的增加而增强。我们实验室使用的BIOGHSC Super Probe Kit PCR实验检测DNA,测得的循环数在28左右，整个PCR过程有4个阶段，基线期---指数增长期---线性增长期---平台期，指数增长期内，PCR有高度重复性，一般的检测指标是看线性图谱的扩增曲线的起跳值（CT值）。

四、荧光定量PCR技术有哪些优点呢？荧光定量P？

普通的PCR大多数是定性实验，而实时荧光定量PCR则定量和定性都可以做。应用领域也不一样，普通PCR一般应用于基因组克隆、DNA测序、RNA反转录等，而实时荧光定量PCR一般应用于mRNA表达量分析、绝对定量、蛋白表达、SNP分析、阴阳性解析等领域。不是定量PCR比PCR好，而是两者应用与不同的领域，起到了不同的作用。荧光定量PCR较普通PCR不同的一点就是可以实时检测PCR扩增产物，从而可进行绝对定量或者相对定量。

五、荧光分析的定量公式？

Ct=-1/lg(1+Ex)*lgX0+lgN/lg(1+Ex)。

n为扩增反应的循环次数，X0为初始模板量，Ex为扩增效率，N为荧光扩增信号达到阈值强度时扩增产物的量。

起始拷贝数越多，Ct值越小。利用已知起始拷贝数的标准品可作出标准曲线，其中横坐标代表起始拷贝数的对数，纵坐标代Ct值。因此，只要获得未知样品的Ct值，即可从标准曲线上计算出该样品的起始拷贝数。

六、pcr荧光定量检测方法？

SYBR Green I 是一种能与双链 DNA 结合发光的荧光染料。其与双链 DNA 结合后， 荧光大大增强。因此， SYBR Green I 的荧光信号强度与双链 DNA 的数量相关，可以根据荧光信号检测出 PCR 体系存在的双链 DNA 数量。

SYBR Green I 的最大吸收波长约为 497 nm，发射波长最大约为 520 nm。PCR 扩增程序一般为 94℃～55℃～72℃三步法，40 个循环。

七、荧光定量pcr模板是？

在实时荧光PCR中。模板的定量有2种方法：绝对定量和相对定量。

绝对定量一般通过已知的标准曲线来确定我们所感兴趣基因的拷贝数； 相对定量指在一定样品中靶序列相对于另一参照序列的量的变化. 如果你做的是DNA的定量，可以用DNA 模板。

你用质粒作为标准品做标准曲线，最后可以换算出来拷贝数，这是绝对定量。

如果是做转录，表达量的变化，需要提取RNA，反转录为cDNA，然后再做相对定量。

八、荧光检测和荧光定量一样吗？

原理不同：荧光定量pcr实时监测与dna结合的荧光染料激发的荧光；普通pcr通过检测插入dna中核算染料的量来测定pcr最终产物量,一般是紫外光.

反应要求：荧光定量对扩增片段有较高的要求,一般为100-300bp；普通定量可以扩增长点的片段.如果不需要检测产物分子量大小,荧光定量可以不进行电泳就对产物进行定量分析,普通pcr必须电泳.

结果：荧光定量可以实现精确定量,普通pcr则不行.荧光定量体现可以看到整个扩增过程,可以看到扩增效率,溶解温度,直接得到的标准曲线等,这些是普通pcr无法实现的.

九、乙肝病毒定量多少为阴性？

乙肝病毒DNA定量正常参考值不超过10的3次方，也就是说不超过1000就属于阴性。不过，由于医院检验室内检测方法不同，正常参考范围也不同，部分医院提供的正常参考值也不超过500。原则上来说，应当以化验单上提供的正常参考范围为标准进行分析判断。

十、乙肝病毒定量怎么看？

乙肝病毒定量指的就是乙肝病毒DNA定量。检查结果的判断，需要结合提供的正常参考值和患者的测定结果进行分析。如果患者的测定值在提供的正常参考值范围以内，说明患者的病毒复制慢、传染性弱。如果测定值超过了给出的正常参考值范围，则说明病毒复制快，传染性强。

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